细胞背景与来源研究血脑屏障BBB的同学对 bEnd.3 应该不陌生它是用得最多的小鼠脑微血管内皮细胞系之一。相比原代脑微血管内皮它的好处是能稳定传代、来源可控做 BBB 通透性、内皮功能、神经炎症的体外实验很方便。bEnd.3 是小鼠脑微血管内皮细胞从患内皮瘤小鼠的脑组织分离经含多瘤病毒中 T 抗原的逆转录病毒TKmT转染永生化。它表达 vWF、能摄取荧光标记的 LDL内皮特性明确主要用于神经科学和血脑屏障研究也适合 3D 培养。来源小鼠脑微血管内皮永生化。贴壁生长低密度时形态不规则长满后形成均匀单层、呈漩涡状排列偏纤维细胞样。应用场景与研究价值神经科学/血脑屏障体外 BBB 模型研究药物跨膜转运、屏障通透性。炎症对 TNF-α、IL-1、LPS 有时间/浓度依赖的响应能诱导 MAdCAM-1、E-selectin、ICAM-1、VCAM-1、P-selectin 等粘附分子适合做内皮炎症与白细胞黏附研究。培养特性与注意事项培养基DMEM 10% FBS 1% 双抗。环境 37℃、5% CO2、饱和湿度。贴壁生长但复苏后恢复慢约一周建议高密度冻存。传代PBS 润洗后用 0.25% 胰酶消化显微镜看到细胞间隙变大、部分脱落即终止900 rpm 离心 3-5 min首次传代 1:2。换液 2-3 天一次。冻存程序性冻存液或 92% FBS 8% DMSO程序降温盒 -80℃ 过夜转液氮。复苏37℃ 水浴至米粒大小冰块150g 离心 1-2 min重悬接种。生物安全BSL-1。注意对血清质量敏感一定要用品质稳定、验证过效果的血清传代久了超过 30 代部分粘附分子表达会变做相关实验记得盯代数。bEnd.3 对血清敏感这点挺折腾人自己试血清容易浪费时间。尚恩生物SUNNCELL有 bEnd.3 现货货号 SNL-158配的是验证过效果的专用培养基和血清细胞都过 STR 鉴定售后有技术支持能少走弯路。