内容概要烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸NADP/NADPH是细胞内核心的氧化还原辅酶其中 NADPH 作为细胞还原力的主要载体参与抗氧化防御、脂质合成、核酸合成等关键生理过程其总量与 NADP/NADPH 比值是反映细胞氧化还原稳态的核心指标与氧化应激、代谢重编程、微生物合成效率密切相关。亚科因生物 Abbkine CheKine™ 辅酶 ⅡNADP (H) 含量检测试剂盒微量法货号 KTB1010基于酶循环放大与 WST-8 显色原理通过酸碱选择性提取分别检测 NADP 与 NADPH检测过程无二者相互转化定量准确可靠。试剂盒线性检测范围为 0.5-20 μM适配细胞、组织、细菌等多种样本能够精准表征细胞氧化还原状态是代谢与氧化应激研究的核心工具。产品介绍亚科因生物 Abbkine KTB1010 试剂盒是专为 NADP/NADPH 定量开发的微量生化检测试剂全套组分包括实验缓冲液、1M 葡萄糖溶液、WST-8 溶液、增强剂溶液、NADP 循环酶混合物、10mM NADPH 标准品、NADP 提取缓冲液、NADPH 提取缓冲液规格为 48 次检测采用蓝冰冷链运输收到后置于 - 20℃避光环境可稳定保存 6 个月。该试剂盒采用分别提取、分别检测的方案可独立测定样本中的总 NADP (H)、NADP 与 NADPH 含量并计算 NADP/NADPH 比值配套的酶循环放大体系大幅提升了检测灵敏度低浓度样本也能精准定量。产品附带详尽的实验操作指南与常见问题解答明确了样本收集、超声破碎、温度控制等关键操作的参数要求针对干扰物质给出了规避建议能够帮助研究者快速建立稳定的检测方法有效降低实验失败风险。检测原理该试剂盒基于葡萄糖脱氢酶介导的酶循环放大反应结合 WST-8 比色法实现定量。反应体系中循环酶持续催化 NADP 与 NADPH 的相互转化同时伴随葡萄糖的氧化生成的 NADPH 在增强剂的作用下将水溶性四唑盐 WST-8 还原为橙黄色甲臜产物。该产物在 565nm 波长处具有特征吸收峰其吸光度值与样本中总 NADP (H) 的含量呈正相关通过酶循环的放大效应检测灵敏度得到显著提升。实验中将样本平均分为两份分别采用酸性提取液与碱性提取液进行处理60℃水浴条件下酸性环境可快速分解 NADPH仅保留 NADP碱性环境可快速分解 NADP仅保留 NADPH。通过分别检测两份样本的信号即可计算出 NADP 与 NADPH 的各自含量以及二者的比值。该提取方案从根源上避免了两种形式的相互转化确保定量结果的准确性。产品优势其一分型检测无交叉转化。采用酸碱选择性提取方案通过温度控制定向分解非目标辅酶形式从样本处理阶段就杜绝了 NADP 与 NADPH 的相互转化相比单一提取法的检测结果更准确比值计算更可靠能够真实反映样本的氧化还原状态。其二酶循环放大灵敏度高。通过酶循环反应实现信号放大结合 WST-8 高灵敏度显色体系检测下限可达亚微摩尔级别线性范围覆盖 0.5-20 μM能够准确检测低丰度样本中的辅酶含量适合微量细胞与微量组织样本的检测。其三操作指导详尽细致。针对样本制备、试剂添加、仪器参数等关键环节给出了明确的操作规范详细解答了提取原理、稀释倍数、空白对照设置等常见问题同时提供了细胞超声破碎的参考参数新手也能快速掌握实验要点。其四性能稳定文献认可。产品经过严格的质量验证批间差异小检测结果重复性好目前已被微生物代谢、兽医微生物、细胞生理等领域的多篇 SCI 期刊引用产品性能得到科研工作者的实际验证。应用领域在氧化应激与抗氧化研究中NADPH 是谷胱甘肽还原酶、硫氧还蛋白还原酶的核心辅酶是维持细胞抗氧化系统的还原力来源。通过检测 NADP/NADPH 比值可精准评估细胞的氧化还原状态验证抗氧化物质的作用效果。在合成代谢与肿瘤代谢研究中NADPH 是脂肪酸、胆固醇、核酸合成的必需还原剂肿瘤细胞代谢重编程会显著改变 NADPH 的代谢稳态。该试剂盒可用于解析肿瘤脂合成重编程机制评估代谢靶向药物的干预效果。在微生物代谢工程研究中NADPH 的供给是微生物合成目标产物的关键限制因素通过检测工程菌的 NADP/NADPH 水平可评估代谢通路改造的效果优化辅酶供给策略提升目标产物的合成效率。在病毒与宿主代谢研究中许多病毒会劫持宿主的嘧啶与辅酶代谢完成自身复制通过检测病毒感染后细胞的 NADP (H) 变化可解析病毒的代谢调控机制为抗病毒靶点筛选提供代谢层面的依据。总结亚科因生物 Abbkine CheKine™ 辅酶 ⅡNADP (H) 含量检测试剂盒 KTB1010 以分型提取无转化为核心优势结合高灵敏的酶循环显色体系能够精准定量样本中 NADP、NADPH 的含量与比值真实反映细胞氧化还原与还原力代谢状态。无论是氧化应激基础研究还是代谢工程应用研究该试剂盒都能提供准确可靠的检测数据是辅酶代谢研究的优质检测工具。