在胚胎干细胞ESC和诱导多能干细胞iPSC培养体系中饲养层细胞Feeder Cells是维持干细胞未分化状态的关键支撑体系。饲养层细胞不仅为干细胞提供贴壁基质还通过分泌成纤维细胞生长因子FGF、白血病抑制因子LIF等关键细胞因子抑制干细胞自发分化、促进其增殖并维持多能性。大鼠胚胎成纤维细胞Rat Embryonic Fibroblasts, REF 是饲养层细胞中最常用的类型之一其分离自妊娠中期12.5-14.5天大鼠胚胎的躯干组织呈典型贴壁生长的成纤维样间质细胞形态。武汉云克隆科技股份有限公司推出的大鼠胚胎成纤维细胞原代细胞Primary Rat Embryonic Fibroblasts, REF正是为了解决干细胞研究中饲养层细胞来源不稳定、质量不可控的长期痛点。REF干细胞培养的“黄金土壤”REF细胞分离自妊娠中期通常为胚胎发育12.5-14.5天的大鼠胚胎躯干组织是典型的贴壁生长的成纤维样间质细胞。它们之所以成为干细胞培养的首选饲养层靠的是实打实的功能分泌关键生长因子。REF细胞能产生抑制ES细胞自主分化和促进ES细胞增殖的因子。它们分泌的成纤维细胞生长因子FGF、白血病抑制因子LIF等能有效促进干细胞的增殖并维持其未分化特性和多潜能性。这种分泌效果优于外源添加的一些因子。提供仿生微环境。REF细胞不仅为多能性干细胞提供生长的基质底物还能分泌维持干细胞多能性的关键生长因子为干细胞的培养提供类似于体内的微环境。支持跨物种重编程。在大鼠胚胎成纤维细胞REF上重编程人角质形成细胞为iPSC其效率显著高于使用传统小鼠胚胎成纤维细胞MEF的方法。这意味着REF不仅是“能用”在某些场景下甚至比MEF更好用。多项研究证实REF饲养层在支持人iPSC重编程和长期未分化增殖方面表现优异。用途广泛。除了作为饲养层REF还广泛应用于病毒包装、细胞衰老研究、细胞外基质生成、细胞因子信号传导、成纤维细胞介导的组织修复研究以及化学诱导神经元ciNC的重编程等前沿方向。原代细胞 和 永生化细胞系选择谁市面上也有一些永生化胚胎成纤维细胞系可以用作饲养层——比如STO细胞系。养起来方便、繁殖快但问题也很明显传了几十代之后基因表达和功能特性已经跟体内真实的胚胎成纤维细胞差得远了——分泌的因子谱变了对干细胞的支撑能力也变了。原代细胞不一样。 它们直接从大鼠胚胎组织中分离出来没经过永生化改造完整保留了供体组织的基因表达和生理特性。用原代REF做饲养层干细胞才能获得最接近体内的微环境支持。云克隆大鼠胚胎成纤维细胞REF关键信息云克隆的REF细胞取自SPF级SD大鼠12.5-14.5天胚胎 的胚胎躯干组织。在标准培养条件下细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。参数规格货号CSI243Ra01品系SD Rat12.5-14.5 days embryo组织来源胚胎躯干规格5×10⁵细胞/管生长方式贴壁生长培养条件DMEM 10% FBS 1%成纤维细胞生长添加物 1%双抗37℃、95%空气、5% CO₂产品形式新鲜分离 / 冻存管配套培养基MSI243Ra11大鼠胚胎成纤维细胞专用完全培养基生物安全性HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测均为阴性质量体系ISO 9001、ISO 13485认证图.云克隆大鼠胚胎成纤维细胞形态图云克隆还对细胞进行了系统的鉴定。免疫荧光鉴定显示波形蛋白Vimentin特异性抗体阳性表达直接证实了细胞的成纤维细胞身份。经鉴定细胞纯度高于90%。关于云克隆云克隆位于武汉深耕原代细胞领域近二十年。公司拥有自建的SPF级实验动物中心持有小动物生产许可证及大、小动物使用许可证。从供体筛选、组织采集到细胞分离与放行检测全程在自有体系内完成不依赖外购组织确保细胞的纯净度和批次间稳定性。图.武汉云克隆试剂生产基地公司已通过ISO 9001、ISO 13485质量体系认证。云克隆已积累十多年的原代细胞制备经验目前已提供超过560种原代细胞产品和超过3000种细胞制剂覆盖人、大鼠、小鼠、犬、猫、兔、猪、羊等近20个物种。