Cy5-NH2 属于花菁类近红外染料的氨基衍生物因其光物理性能、可反应的伯氨基以及良好的生物相容性用于蛋白质、核酸、多肽及药物载体的荧光标记。xi an瑞.禧.小编整理的内容如下常用名花青5胺 、Cy5标记氨基、花菁染料Cy5-氨基英文名Cyanine5 amine hydrochloride、CY5-amine、CY5-NH2CAS号 1807529-70-9化学结构花菁骨架 活性氨基1. 母核结构——五甲川花菁Cy5两端杂环 吲哚啉或苯并吲哚啉提供刚性与光稳定性共轭桥 5 个次甲基–CH构成的共轭链决定吸收/发射波长 ≈ 650 nm近红外区取代基 杂环氮上的烷基链乙基/丙基/磺酸烷基调控水溶性磺酸基–SO₃H 赋予水溶性降低非特异吸附2. Cy5-NH2 的特点在其中一个杂环的烷基侧链末端引入伯氨基–NH₂通常通过 C2C6 亚烷基间隔臂连接避免氨基直接连入共轭体系导致荧光猝灭。典型结构磺化型两个吲哚啉环 5 位各带一个磺酸基一侧 N-烷基链末端为 –CH₂–CH₂–NH₂反应化学1. 核心反应EDC/NHS 酰胺偶联标记羧基这是常用的标记方式适用于含羧基的蛋白质等分子。活化 蛋白质 EDC sulfo-NHSMES 缓冲液 pH 5.5~6.0室温 15~30 min偶联 调 pH 至 7.2~7.5加入 Cy5-NH₂DMSO 溶解染料:蛋白 1:5~1:20避光反应 2~4 h 或 4℃ 过夜终止 加 1 M TrispH 7.5淬灭纯化 脱盐柱 / 透析 / HPLC 去除游离染料检测 A₂₈₀ A₆₅₀ 计算 D/P 比注意禁用含伯胺的缓冲液Tris、甘氨酸禁用还原剂DTT、TCEP及巯基化合物2. 替代反应还原胺化标记醛基适用于糖蛋白氧化糖链产生醛基或醛修饰核酸。Cy5-NH₂ 醛基 → 希夫碱 → NaBH₃CN 还原 → 稳定胺键CY5-NH2与相关衍生物对比Cy5-NH2 的应用应用方向方案场景抗体标记Cy5-NH₂ NHS-抗体流式细胞术、免疫荧光、活体成像FRET 探针Cy5受体 Cy3/FITC供体高效 FRET 配对核酸 FISH氨基化寡核苷酸 Cy5-NH₂近红外 FISH 探针纳米载体NHS-PEG-DSPE 修饰纳米粒 Cy5-NH₂荧光示踪活体成像Cy5 标记靶向探针660 nm 激发小动物近红外成像穿透深超分辨显微Cy5 用于 STORM/PALM需还原缓冲液配合瑞禧tech小编总结分享.2026.6